测定蛋白质分子量的常用方法?蛋白纯化常用的标签有哪些图片
2023-08-17 17:02:19 文章来源 :网络 围观 : 次 评论
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如果你手上有比较大量的纯度比较高的蛋白质的话。可以尝试用以下比较直接的方法:
1. isothermal titration calorimetry (ITC),直接测定两个蛋白互相作用的Kd值。
2. AUC,也就是超速离心分析。可以直接测定两个蛋白相互作用与否。
3.SAXS, 也就是X-ray小角散乱。不过技术难度比较大一些。
4. 溶液NMR,这个应该可以但不太了解。
5. 结晶再解构,这个不用解释了。比较究极一点。
6.cryo-EM,同上。比较究级的方法。
7. 最简单常用的,gel-filtration,观察有没有oligomer的分子量峰出现。但是相互作用弱的话很难观测到。
8.更简单常用的nativePAGE,同上,相互作用弱则很难观测到。
9.用氨基架桥试剂共价连接,然后SDS-PAGE。看看有没有oligomer的带。暂时想到这些,跨度比较大。
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